目的探讨不同龋敏感儿童口腔变异链球菌 HtrA mRNA和蛋白质的表达情况与乳牙龋坏程度和 HtrA的关系。方法以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株，复苏，增菌，分离纯化核酸，采用逆转录 PCR（RT-PCR）法，提取变异链球菌临床分离株总RNA ，凝胶电泳检测RNA完整性，合成cDNA ，PCR扩增，将扩增产物凝胶成像系统下观察记录结果，将目的基因HtrA及内参的电泳图像利用凝胶定量分析软件Gel-Pro analyzer 4．0进行灰度扫描，分析计算基因相对表达值；采用蛋白质印迹（Western blot）法，验证变异链球菌临床分离株总蛋白，结果用Bio-Rad凝胶摄像分析系统扫描入计算机中，凝胶定量分析软件Quantity One 4．4．0分析其灰度值，计算蛋白的相对表达水平。结果高龋、中龋及无龋儿童口腔变异链球菌临床分离株HtrA mRNA的表达和 HtrA蛋白的表达均存在差异，从高到低为高龋组、中龋组、无龋组，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离菌株HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达均存在差异，龋敏感性越高，HtrA mRNA的表达和 HtrA蛋白的表达越高。
作者：杨江华；郭夕源；王光平；李明霞；刘兴容
来源：重庆医学 2013 年 24期
