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目的 探讨miR-29a在人椎间盘退变髓核(NP)细胞凋亡的调控作用.方法 体外培养椎间盘退变NP细胞,构建重组真核表达质粒cherry/miR-29a,脂质体Lipofectamine转染进入NP细胞,应用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测NP细胞中miR-29a的表达变化,Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3前体的表达变化,流式细胞仪检测NP细胞凋亡水平变化.结果 NP细胞转染重组质粒cherry/miR-29a 48 h后,NP细胞中miR-29a的表达水平较NP细胞和转染空质粒的NP细胞中的miR-29a明显升高(P<0.05);凋亡相关蛋白Caspase 3前体的水平则明显下降(P<0.05);NP细胞凋亡水平明显升高(P<0.05).结论 在椎间盘NP细胞中过表达miR 29a能促进NP细胞凋亡,其机制可能是通过Caspase3途径起作用.

作者:刘晓潭;田林强;王宏伟;郭志豪

来源:重庆医学 2016 年 45卷 14期

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作者:
刘晓潭;田林强;王宏伟;郭志豪
来源:
重庆医学 2016 年 45卷 14期
标签:
椎间盘 细胞凋亡 Caspase-3 过表达 miR-29a 椎间盘退变NP细胞 intervertebral disk apoptosis Caspase-3 overexpression miR-29a intervertebral disc degeneration nucleus pulposus cells
目的 探讨miR-29a在人椎间盘退变髓核(NP)细胞凋亡的调控作用.方法 体外培养椎间盘退变NP细胞,构建重组真核表达质粒cherry/miR-29a,脂质体Lipofectamine转染进入NP细胞,应用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测NP细胞中miR-29a的表达变化,Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3前体的表达变化,流式细胞仪检测NP细胞凋亡水平变化.结果 NP细胞转染重组质粒cherry/miR-29a 48 h后,NP细胞中miR-29a的表达水平较NP细胞和转染空质粒的NP细胞中的miR-29a明显升高(P<0.05);凋亡相关蛋白Caspase 3前体的水平则明显下降(P<0.05);NP细胞凋亡水平明显升高(P<0.05).结论 在椎间盘NP细胞中过表达miR 29a能促进NP细胞凋亡,其机制可能是通过Caspase3途径起作用.

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