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目的 构建高滴度大鼠Hes1腺病毒干扰载体(Ad-Hes1-shRNA).方法 设计3对Hes1-shRNA寡核苷酸序列,通过定向克隆构建pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA干扰质粒,将pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA和pHBAd-BHG共转染293T细胞,以包装Ad-Hes1-shRNA,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定.Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达.结果 pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA构建成功,Ad-Hes1-shRNA包装顺利,滴度为1.0×1011 PFU/mL,并可在H9c2心肌细胞内发挥干扰效应.结论 Ad-Hes1-shRNA包装成功,在心肌细胞中具有Hes1的干扰效应.
作者：周学亮；方义湖；赵勇；邹斌；徐华；吴起才；刘季春
来源：重庆医学 2016 年 45卷 34期
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