目的 利用基因芯片技术和实时荧光定量PCR技术,结合Targets scan软件和Western blot技术,初步探讨微小RNA-126(miR-126)调控CD4+T细胞功能的分子机制.方法 提取野生型小鼠(对照组)和miR-126基因敲减小鼠(miR-126敲减组)脾淋巴细胞总RNA,送基因芯片测序,筛选出差异表达基因;运用Targets scan和miR-Walk软件预测miR-126可能作用的靶分子,经筛选后将胰岛素受体底物-1(IRS-1)作为miR-126的靶分子;进一步利用实时荧光定量PCR检测两组小鼠脾CD4+CD62L+T细胞中IRS-1的水平变化,Western blot技术检测两组小鼠脾淋巴细胞蛋白激酶B(AKT)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)及其磷酸化水平.结果 基因芯片分析筛选出大量差异表达的基因,与对照组比较,IRS-1的表达上调2.7005倍.Target scan和miR-Walk软件预测miR-126可与IRS-1的3'非翻译区(3'UTR)结合,提示IRS-1是miR-126作用的靶分子.PCR显示miR-126敲减组小鼠CD4+T细胞中IRS-1的表达明显上调(P<0.05),Western blot显示miR-126敲减组小鼠CD4+T细胞中AKT、ERK及其磷酸化水平明显增加(P<0.05).结论 MiR-126通过IRS-1/AKT/ERK信号通路调控CD4+T细胞的功能.
作者：胡燕；王小妹
来源：重庆医学 2020 年 49卷 2期
