目的 研究不同损伤处理的内皮祖细胞(EPC)来源微粒(MPs)对EPC的影响.方法 培养EPC并使用流式细胞术鉴定,用高糖(HG)、肿瘤坏死因子(TNF)-α重组蛋白处理EPC,进而提取MPs.用透射电镜观察EPC内微管、高尔基体等细胞器的结构变化,MTT检测细胞增殖情况,细胞划痕实验评价细胞迁移能力,细胞管腔形成实验检测管腔形成情况.用实时荧光定量PCR(qPCR)和 Western blot检测不同处理后EPC中内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、大鼠肉瘤(RAS)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达水平.结果 与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs组微管结构完整,长度有所缩短,高尔基体结构相对完整.与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs组EPC增殖率下调,细胞迁移能力降低,成管减少(P<0.05).与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs 组 eNOS、SIRT1、RAS 和 ERK 的 mRNA 及其蛋白表达下调(P<0.05).结论 HG 和TNF-α介导EPC损伤来源的MPs可能通过调控SIRT1/ERK1通路蛋白的表达,使EPC内含细胞器的结构改变,从而影响EPC的生物学功能.
作者:马艺萍;阿不都热合曼·米吉提;袁玉娟;吐尔孙阿依·依斯米提拉;阿卜拉江·艾合麦提;穆叶赛·尼加提
来源:重庆医学 2023 年 52卷 23期