目的 观察S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性及迁移能力的影响.方法 查找人S100A6mRNA序列,设计针对其编码区的siRNA序列;根据siRNA序列设计合成shRNA并构建shRNA重组表达载体;用阳离子脂质体转染重组质粒至Eca109细胞,于转染后48 h,采用real-time PCR法检测细胞中S100A6 mRNA表达量,蛋白质印迹法检测细胞中S100A6蛋白表达量;MTT法检测细胞增殖活性,绘制细胞生长曲线;通过细胞划线法检测基因沉默对于肿瘤细胞迁移能力的影响.结果 成功构建了针对S100A6基因的shRNA真核表达载体;通过脂质体转染的方法可在Eca109细胞内高效沉默S100A6,细胞转染后48 h,与未转染细胞比较,S100A6 mRNA表达量降低,且差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),蛋白表达量检测结果与mRNA检测结果一致;S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞增殖活性,与未转染细胞比较,差异有统计学意义(P＜0.01); S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞迁移能力.结论 通过shRNA表达载体途径可在Eca109细胞中有效沉默S100A6基因,S100A6基因沉默能够显著抑制Eca109细胞增殖活性及迁移能力.
作者：陆文铨；邱彦；庞涛；陶霞；陈万生
来源：第二军医大学学报 2014 年 35卷 1期
