目的 通过体外诱导获得肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)耐药菌株,对比分析S.pn诱导耐药前后红霉素结合域的变异.方法 采用最低抑菌浓度(MIC)递增方法对S.pn标准菌株tigr4、tigr2 临床分离敏感株进行红霉素体外诱导耐药,PCR与RT-PCR对诱导前后rplD、rplV基因以及23S rRNA扩增并测序,CPHmodels-2.0蛋白质空间构象预测系统对诱导前后rplD、rplV基因编码的核糖体蛋白L4和L22进行空间构象预测分析.结果 诱导后tigr4 MIC由0.031 2 mg/L增加到256 mg/L,而临床分离敏感株MIC均由0.031 2 ms/L增加到32 ms/L.诱导前后测序结果对比显示标准菌株tigr4核糖体蛋白L4发生V32A变异,L22发生D35G变异,而临床分离敏感株核糖体蛋白L4发生Q67R、K68E变异.空间构象分析L22的D35G及L4的Q67R、K68E变异导致其相应的表面空间构象发生明显改变.结论 S.pn可通过红霉素体外诱导而导致耐药,其耐药机制与红霉素结合域发生新的变异有关.
作者：王强；王跃；刘明方
来源：第三军医大学学报 2009 年 31卷 12期
