目的 探讨Toll样受体2(TLR2)、TLR4介导的免疫调节信号通路在结核分枝杆菌感染诱导的单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemo attractant protein-1,MCP-1)产生中所起的作用.方法 建立人型结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型,获取模型组及对照组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM),对BALF中AM进行计数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中MCP-1水平,Western免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测肺组织中MCP-1蛋白含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定模型组及对照组AM中TLR2、TLR4mRNA的表达;抗体干预组的AM用TLR2、TLR4抗体预处理并与H37Rv菌株共培养,并设未予以抗体预处理的PBS组及未作任何处理的对照组,分别用ELISA、Western blot法检测AM培养液中及AM中的MCP-1水平,以观察TLR2、TLR4在H37Rv诱导MCP-1生成所起的作用.结果 模型组BALF中AM计数及MCP-1蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);模型组小鼠肺组织中MCP-1蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);模型组AM内TLR2、TLR4 mRNA表达显著高于对照组(P<0.05);模型组BALF中MCP-1水平与AM数目呈正相关(r=0.92,P<0.05),并分别与TLR2、TLR4 mRNA表达呈正相关(r=0.88, P<0.05;r=0.82,P<0.05).PBS组AM及其培养
作者:李敏超;杜先智;周向东
来源:第三军医大学学报 2010 年 32卷 20期