目的 研究乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X,HBx)对肝卵圆细胞的转化作用.方法 构建表达HBx和嘌呤霉素抗性的慢病毒LV-HBx-PM及对照慢病毒LV-PM分别感染WB-F344肝卵圆细胞.以感染HBx慢病毒载体的WB-F344细胞作为实验组(WB-F344-HBx),以感染对照慢病毒载体的WB-F344细胞作为阴性对照组(WB-F344-PM),以未转染慢病毒载体的培养相同代数的WB-F344细胞作为空白对照组(WB-F344-Mock).通过Real-time RT-PCR和Western blot验证各组细胞中HBx的表达;运用MTT法、流式细胞术、细胞迁移实验、裸鼠移植瘤实验观察各组细胞的增殖能力、细胞周期、迁移能力和成瘤能力.结果 WB-F344-HBx细胞在基因水平和蛋白水平稳定高效表达HBx;WB-F344-PM和WB-F344-Mock不表达HBx.与阴性对照组WB-F344-PM相比,实验组WB-F344-HBx G0/G1期细胞比例降低[(55.98 ±0.39)％ vs (61.65 ±1.37)％,P＜0.01],G2/M期细胞比例升高[(15.05±1.67)％vs(7.83±0.46)％,P＜0.01],细胞周期进程加快,细胞增殖能力增强(P＜0.01),具有更强的细胞迁移能力和成瘤能力;而阴性对照组WB-F344-PM与空白对照组WB-F344-Mock相比,细胞周期、细胞增殖能力、细胞迁移能力和成瘤能力无显著变化.结论 乙型肝炎病毒X蛋白可诱导肝卵圆细胞恶性转化.

作者：廖凯；王月飞；卢乐乐；张雷达

来源：第三军医大学学报 2014 年 36卷 10期