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目的: 构建结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B-Ag85A融合基因及其双价抗原真核表达载体. 方法: 采用gene SOEing法将 Ag85B和Ag85A编码基因用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser)3行PCR扩增融合,经限制性内切酶消化后克隆入pcDNA3.1(+)中构建真核表达质粒pCDAg85B-A,酶切、DNA测序鉴定,用脂质体法将pCDAg85B-A转染COS-7细胞,采用RT-PCR, ELISA方法检测其表达. 结果:Ag85B-Ag85A融合基因定向克隆入pcDNA3.1(+),双向测序表明碱基无突变,Ag85B-Ag85A融合基因在真核细胞中能表达. 结论: 成功构建结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B-Ag85A融合基因及其双价抗原真核表达载体,为结核病基因疫苗的研究奠定基础.
作者：江山；朱道银；蒋英；骆旭东；陈全
来源：第四军医大学学报 2003 年 24卷 21期
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