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目的采用"两步转化法"高效制备含胞嘧啶脱氨酶(CD)自杀基因的腺病毒重组载体.方法将质粒pAdEasy-1线性化后转化于BJ5183菌,制备AdEasy-1细菌;自载体pBS-CD中切出CD基因,亚克隆至穿梭质粒pAdtrackCMV上,构建的pAdtrackCMV-CD线性化后转化AdEasy-1细菌,抽提同源重组腺病毒质粒,Pac Ⅰ酶切后转染293细胞,在293细胞中包装与扩增,利用GFP报告基因进行滴度测定.同时按"一步转化法"进行同样的重组腺病毒制备,比较二者的优劣性.结果"两步转化法"终产物17个克隆中13个正确,正确率为76.5
作者：杨文宇；黄宗海；汤福祥；钱勇；车小燕
来源：第一军医大学学报 2004 年 24卷 2期
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