目的：构建细胞角蛋白8（CK8）的双标慢病毒干涉载体，获得高滴度慢病毒颗粒，感染HCT116细胞建立稳定株，检测CK8敲低对细胞凋亡的影响。方法将CK8的siRNA序列插入慢病毒表达载体GV248，并与包装质粒PMD、SPA共转染293T细胞，36、48 h分两次收集慢病毒上清，应用流式细胞术检测病毒滴度。获得的病毒感染HCT116细胞，用嘌呤霉素筛选阳性细胞， Western blotting检测干涉效果。采用Annexin V/PI染色检测干涉CK8对化疗药物顺铂诱导的细胞凋亡的影响。结果与结论成功构建CK8干涉慢病毒载体并得到干涉稳定株，在HCT116细胞中干涉CK8使细胞对顺铂引起的凋亡更加敏感。
目的：构建细胞角蛋白8（CK8）的双标慢病毒干涉载体，获得高滴度慢病毒颗粒，感染HCT116细胞建立稳定株，检测CK8敲低对细胞凋亡的影响。方法将CK8的siRNA序列插入慢病毒表达载体GV248，并与包装质粒PMD、SPA共转染293T细胞，36、48 h分两次收集慢病毒上清，应用流式细胞术检测病毒滴度。获得的病毒感染HCT116细胞，用嘌呤霉素筛选阳性细胞， Western blotting检测干涉效果。采用Annexin V/PI染色检测干涉CK8对化疗药物顺铂诱导的细胞凋亡的影响。结果与结论成功构建CK8干涉慢病毒载体并得到干涉稳定株，在HCT116细胞中干涉CK8使细胞对顺铂引起的凋亡更加敏感。
