目的探讨人乳头瘤病毒-16 (Human papillomavirus, HPV-16)长调控区内meCpG位点的去甲基化对3种HPV阳性头颈肿瘤细胞的影响.方法采用5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-2'-dc)处理后,应用BSP法检测UM-SCC47、CaSki及SiHa 3种HPV-16阳性肿瘤细胞长调控区内CpG位点的甲基化状态;采用实时荧光定量PCR法检测HPV-16 E6与E7 mRNA的表达水平;检测5-Aza-2'-dc对细胞生长、细胞凋亡的影响;采用Lipolnfectamine RNAiMAX转染siRNA,对E6和E7表达进行沉默,随后检测细胞增殖抑制、凋亡以及周期等生物学状态的变化.结果采用浓度为0.5 pmol/L的5-Aza-2'-dc对细胞进行96 h的处理具有最好的去甲基化效果.用5-Aza-2'-dc去甲基化处理后,UM-SCC47细胞和CaSki细胞内E6与E7 mRNA的表达水平明显降低,相比对照组差异均有统计学意义(t=1,356、2.623,P=0.031、0.005;t=1.798、2,015,P=0.011、0.009) ; SiHa细胞E6与E7 mRNA的表达水平较对照组无明显差异(t=1.591、1.153,P=1.105、0.753).用5-Aza-2'-dC处理后,细胞增殖受到明显抑制.对E6与E7表达进行沉默后,3种细胞的生长均受到抑制.3种细胞调亡情况均明显增加,阻滞于S期、G2/M期的细胞均明显增加,与对照组相比差异均有统计学意义.结论去甲基化处理后,长调控区内甲基化

作者：俞艳萍；陆璐

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科 2018 年 25卷 2期