目的:本文旨在研究bcl-2基因家族促凋亡蛋白Bak在肝癌细胞凋亡中的作用,同时评价它作为肿瘤治疗的潜在靶基因的可能性.方法:免疫组织化学法研究Bak在HCC组织中的分布,并结合TUNEL染色,分析Bak在肝癌细胞凋亡中潜在的作用.采用MT Ⅱ调节系统,通过加锌离子(ZnSO4,100μmol/ L)诱导Bak基因表达.HCC 9204肝癌细胞系作为靶细胞,获得表达Bak基因的稳定转染子.结果:在HCC组织中,Bak抗原的表达主要位于肝(癌)细胞的胞浆,呈细颗粒状均匀分布,在癌细胞中偶有核内表达.TUNELLI的分析结果显示,低TUNELLI组Bak表达的细胞阳性率显著低于高TUNELLI组的细胞阳性率(P<0.01).可诱导性Bak基因过表达的HCC 9204细胞显示广泛的细胞死亡.TUN EL染色证实细胞核的碎片化,Annexin V实验证实细胞膜不对称丧失,从而提示这种细胞死亡是凋亡.流式细胞仪显示在诱导后24h,有19.29
作者:李江;于欣欣;郑建勇;杨新科;张杰;王文亮
来源:癌症 2000 年 19卷 9期