目的构建表达鼠源化抗肝癌重组免疫毒素mscFv25-TNFα(鼠源化单链抗体mscFv25融合人突变型TNFα),对荷肝癌(SMMC-7721)裸鼠进行体内杀伤活性实验.方法运用PCR方法扩增TNFα并在其5'和3'端增添相应酶切位点,经限制性内切酶酶切后,构建成PGEX4T-1/msc Fv25-TNFα融合蛋白表达载体,转化大肠杆菌JM109,通过IPTG诱导进行表达,在经过蛋白纯化及Western bolt鉴定之后,将重组免疫毒素经尾静脉注射治疗荷肝癌裸鼠,2周后处死裸鼠,观察肿瘤的体积、质量,并对瘤组织进行TNFα免疫组化染色.结果 mscFv25-TNFα治疗组对荷肝癌裸鼠的有效率为5/5,其中2/5为完全缓解,3/5为部分缓解,与TNFα对照组相比,疗效明显高于对照组(χ2=4.62,P＜0.05),经mscFv25-TNFα治疗后的瘤组织,TNFα呈弥漫性阳性反应,阳性颗粒主要存在于瘤组织的胞质中.结论鼠源化抗肝癌重组免疫毒素mscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠具有一定的抑瘤作用.
作者：张静；刘彦仿；杨守京；乔庆；程虹；张素珍；马福成
来源：肝胆外科杂志 2003 年 11卷 3期
