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目的通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白.方法应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37RvAg85B DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建Ag85B重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);以IPTG诱导转化子,通过SDS-PAGE电泳鉴定rAg85B的表达水平,采用Novagen公司生产的His.Bind蛋白纯化试剂盒纯化rAg85B蛋白.结果重组质粒pET24b-Ag85B测序表明与报道的序列相同.它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30
作者：吴雪琼；张俊仙；郑越；张灵霞
来源：广东医学 2003 年 24卷 5期
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