目的 分离、鉴定小细胞肺癌(SCLC)患者血清中外泌体,探讨外泌体内信使RNA(mRNA)和长链非编码RNA(lncRNA)表达谱.方法 利用ExoRNeasy试剂盒分离5例SCLC患者血清外泌体,采用电镜、粒径分析、CD63和CD68两个表面标志物检测鉴定外泌体,提取RNA后,应用二代测序技术进行1例样本的转录组测序,分析mRNA和lncRNA表达谱,并在4例SCLC中采用实时荧光定量PCR验证测序结果.结果 电镜下可见大小均一,形态呈杯口状颗粒,粒径在40～130 nm间,CD63和CD81表达均呈阳性,与外泌体特征吻合.转录组测序共检测出1 822个mRNA和890个lncRNA分子,其中表达丰度最高的mRNA依次为血红蛋白β 链、血红蛋白A2和多角体蛋白促进因子结合蛋白,lncRNA依次为ARHGEF26-AS1、WARS2-IT1和DARS-AS1.进一步在其余样本中检测上述lncRNAs,发现其阳性表达率分别为75％、100％ 和50％,表明RNA-seq结果基本可靠.结论 经过形态、粒径大小及特征蛋白分析证实SCLC血清外泌体的存在,其内可检测到大量的mRNA和lncRNA分子,为深入探讨SCLC外泌体内RNA分子的临床应用提供基础数据.
作者：刘丽；丘福满；赵祝香；杨磊
来源：广东医学 2018 年 39卷 3期
