目的 研究热休克蛋白90(Hsp90)在糖尿病肾病肾脏中的表达变化,探讨其在糖尿病肾病中的作用及可能的机制.方法 应用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,通过尿蛋白水平及血糖检测将实验动物分为正常对照(CTR)组、糖尿病(DM)组、糖尿病肾病(DN)组.PAS染色评价各组肾组织的病理变化,免疫荧光检测各组肾小球中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、小凹蛋白(Caveolin-1)、Hsp90α和Hsp90β表达,Western bolt法和RT-PCR法分别检测各组肾小球中eNOS、Caveolin-1、Hsp90α和Hsp90β的蛋白及mRNA表达水平,免疫共沉淀检测各组肾小球中eNOS与Caveolin-1、Hsp90α与eNOS、Hsp90β与eNOS结合水平,Western bolt法检测各组eNOS Ser1177磷酸化蛋白水平表达,eNOS分类检测试剂盒测定eNOS活性.结果 与CTR组和DM组相比,DN组大鼠肾小球普遍肥大,系膜基质增加明显;各组肾小球内的eNOS、Cave-olin-1、Hsp90α和Hsp90β的免疫荧光强度无明显差异.各组肾小球内eNOS、Caveolin-1、Hsp90α和Hsp90β的mRNA表达无明显变化.各组肾小球内eNOS、Caveolin-1、Hsp90α和Hsp90β的蛋白表达无明显差异.与CTR组和DM组相比,DN组Hsp90α与eNOS的相互作用明显减弱,eNOS与Caveolin-1的相互作用明显增强,eNOS Ser1177的磷酸化蛋白水平明显下降,eNOS的活性
作者:王娇;唐俊明;杨婷;张可;李梦;陈铭;田少江
来源:广东医学 2018 年 39卷 16期