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目的 建立慢性粒细胞白血病(CML)的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞(LSCs)治疗CML的研究提供良好的动物模型.方法 将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-tTA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、tTA和GFP基因三阳性的小鼠(GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠).通过诱导GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量(900 cGy)辐照的FVB/N野生型小鼠.移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例.结果 PCR结果显示,GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例明显升高.结论 成功建立了GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型.

作者:廖芬芳;陈永恒;吴清清;程琳;周晓明;王伟章

来源:广东药学院学报 2016 年 32卷 4期

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作者:
廖芬芳;陈永恒;吴清清;程琳;周晓明;王伟章
来源:
广东药学院学报 2016 年 32卷 4期
标签:
慢性粒细胞白血病 转基因小鼠 Bcr-abl chronic myeloid leukemia transgenic mice Bcr-abl
目的 建立慢性粒细胞白血病(CML)的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞(LSCs)治疗CML的研究提供良好的动物模型.方法 将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-tTA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、tTA和GFP基因三阳性的小鼠(GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠).通过诱导GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量(900 cGy)辐照的FVB/N野生型小鼠.移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例.结果 PCR结果显示,GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例明显升高.结论 成功建立了GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型.

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