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目的 证实与正常浓度葡萄糖培养之血管平滑肌细胞(VSMCs)相比,在高浓度葡萄糖环境下,VSMCs的凋亡减少,增殖过度,并探讨其与凋亡相关基因bcl-2表达变化之间的关系.方法体外组织贴块法培养血管平滑肌细胞,分为正常浓度葡萄糖组(5 mmol/L葡萄糖)、甘露醇高渗对照组(即5 mmol/L葡萄糖+20 mmol/L甘露醇)和高浓度葡萄糖组(25 mmol/L葡萄糖),分别用实时定量荧光PCR法和Western 印迹法检测凋亡相关蛋白bcl-2在3种培养环境下VSMCs中表达的情况;MTT比色法检测3种不同培养环境下VSMCs的增殖状况;流式细胞仪检测经Annexin-V/PI 双染的VSMCs的凋亡率.结果 与正常浓度葡萄糖组(NG)相比,高浓度葡萄糖(HG)环境培养的VSMCs,其bcl-2表达增强,MTT比色法显示其细胞增殖率增加,流式细胞仪显示其细胞早期凋亡比率降低,甘露醇对照组与NG组无统计学差异.结论在高浓度葡萄糖的作用下,VSMCs的抗凋亡基因bcl-2的表达增强,导致VSMCs的凋亡减少,增殖增加,从而引起糖尿病血管并发症的发生.

作者:张佼佼

来源:医学分子生物学杂志 2013 年 10卷 2期

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作者:
张佼佼
来源:
医学分子生物学杂志 2013 年 10卷 2期
标签:
糖尿病 葡萄糖 血管平滑肌 bcl-2 凋亡 增殖
目的 证实与正常浓度葡萄糖培养之血管平滑肌细胞(VSMCs)相比,在高浓度葡萄糖环境下,VSMCs的凋亡减少,增殖过度,并探讨其与凋亡相关基因bcl-2表达变化之间的关系.方法体外组织贴块法培养血管平滑肌细胞,分为正常浓度葡萄糖组(5 mmol/L葡萄糖)、甘露醇高渗对照组(即5 mmol/L葡萄糖+20 mmol/L甘露醇)和高浓度葡萄糖组(25 mmol/L葡萄糖),分别用实时定量荧光PCR法和Western 印迹法检测凋亡相关蛋白bcl-2在3种培养环境下VSMCs中表达的情况;MTT比色法检测3种不同培养环境下VSMCs的增殖状况;流式细胞仪检测经Annexin-V/PI 双染的VSMCs的凋亡率.结果 与正常浓度葡萄糖组(NG)相比,高浓度葡萄糖(HG)环境培养的VSMCs,其bcl-2表达增强,MTT比色法显示其细胞增殖率增加,流式细胞仪显示其细胞早期凋亡比率降低,甘露醇对照组与NG组无统计学差异.结论在高浓度葡萄糖的作用下,VSMCs的抗凋亡基因bcl-2的表达增强,导致VSMCs的凋亡减少,增殖增加,从而引起糖尿病血管并发症的发生.

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