目的 探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)调节miR-324-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)轴对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝癌组织、癌旁组织以及人正常肝细胞、人肝癌细胞(Huh-7、SMMC-7721、MH-CC97 L)中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达水平;将肝癌细胞系Huh-7 细胞分为:ctrl组、si-NC组、si-BLACAT1 组、si-BLACAT1+miR-NC组、si-BLACAT1+miR-324-5p inhibitor组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达;CCK-8 法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;蛋白免疫印迹检测细胞中MAP4K3、PCNA、MMP2、MMP9、c-Myc、Cyclin D1 的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证BLACAT1 和miR-324-5p、miR-324-5p和MAP4K3 的关系.结果 肝癌组织和人肝癌细胞系中 BLACAT1、MAP4K3 mRNA 表达水平显著增加,miR-324-5p表达显著降低(P<0.05);与 ctrl组、si-NC 组比较,si-BLACAT1 组 Huh-7 细胞的 BLACAT1、MAP4K3 mRNA表达、A450值、迁移率、侵袭率、PCNA、MMP2、MMP9、MAP4K3、c-Myc、Cyclin D1 表达明显降低(P<0.05),miR-324-5p表达显著增加(P<0.05);抑制miR-324-5p表达
作者:廖运国;唐梓瑜;李超;蒲嘉骐;邱世香;杨甜
来源:医学分子生物学杂志 2023 年 20卷 4期