目的:初步研究幽门螺杆菌(
Helicobacter pylori ,HP)鞭毛蛋白FliD的部分免疫学特征。
方法:原核表达重组FliD蛋白;制备rFliD兔多克隆抗体,同时酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测rFliD特异性免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)与免疫球蛋白M(immunoglobulin M, IgM)水平;酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot, ELISPOT)检测rFliD刺激Hp患者外周血单核细胞(peripheral blood monocytes, PBMC)后的γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)及白细胞介素4(interleukin4, IL-4)表达水平;流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测rFliD蛋白刺激胃粘膜上皮细胞(Gastric epithelial cells, GES-1)细胞后的凋亡比例。结果:rFliD原核表达纯化成功;成功制备高效价rFliD兔多克隆抗体,并发现rFliD可诱导家兔产生高水平IgG与IgM,与免疫前血清比差异具有统计学意义(
t值分别为5.42、8.18,
P值均<0.05)),效价可达1:102 400;与健康对照组(healthy control, HC)相比,HP组rFliD特异性IFN-γ与IL-4均显著增高(
t值分别为21.91, 13.57,
P值均<0.05),但产生IFN-γ的水平显著高于IL-4(
t=7.55,
P< 0.05);与磷酸盐缓冲液(phosphate
作者:王倩;杜岩青;袁纯辉;张晓方;罗微
来源:国际免疫学杂志 2021 年 44卷 4期