目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)CDK5RAP3在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭的调节作用。方法:通过TCGA数据库分析CDK5RAP3在胃癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过转染pcDNA3.1-CDK5RAP3质粒至Hs-746T细胞,构建过表达CDK5RAP3胃癌细胞株(CDK5RAP3组),转染pcDNA3.1质粒至Hs-746T细胞(对照组)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组细胞中CDK5RAP3表达量的变化。CCK-8法和Transwell实验分别检测过表达CDK5RAP3对Hs-746T细胞增殖、侵袭的影响。通过starBase v2.0数据库预测CDK5RAP3和miR-223-3p的结合位点。双荧光素酶报告基因实验验证CDK5RAP3和miR-223-3p的直接结合。qRT-PCR检测各组Hs-746T细胞中miR-223-3p表达水平。Western blotting检测各组Hs-746T细胞中增殖蛋白和侵袭蛋白的表达水平。实验数据采用SPSS 17.0软件进行分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(
±
s)表示,两组间比较采用
t检验,多组均数间比较采用单因素方差分析。
结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中CDK5RAP3表达水平明显降低(
P<0.01)。对照组和CDK5RAP3组Hs-746T细胞中CDK5RAP3表达分别为(1.08±0.77)和(10.63±2.14),差异有统计学意义(
P<0.01)。上调CDK5RAP3显著降低Hs-746
作者:陈洪焱;肖萍;李昀晖;柯春霞;高勇;占桂香
来源:国际外科学杂志 2022 年 49卷 9期