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目的:构建并鉴定重组逆转录病毒载体pLNCX2-TH,建立稳定的PT67产病毒细胞系,并观察其对NIH3T3 细胞的感染效率,为基因调控干细胞分化治疗帕金森病奠定基础.方法:采用基因工程技术,将酪氨酸羟化酶(TH)基因片段克隆至逆转录病毒载体pLNCX2-MCS上,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行病毒包装、扩增,最后通过感染NIH3T3 细胞,测定病毒滴度.结果:酶切、测序结果与TH基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致,病毒滴度达1.6×106 pfu/mL,对NIH3T3细胞有较高的感染效率.结论:应用基因工程技术可成功构建重组逆转录病毒pLNCX2-TH,建立PT67产病毒细胞系,为帕金森病的基因治疗创造了条件.
作者：刘晓艳；康慧聪；徐波；胡琦；许峰；朱遂强
来源：神经损伤与功能重建 2009 年 4卷 6期
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