目的 探讨质膜型唾液酸酶(NEU3)活性对骨肉瘤MG-63细胞在体外增殖及凋亡的调控作用.方法 体外培养MG-63细胞,以抗NEU3抗体免疫荧光染色,显示NEU3在MG-63细胞中的定位;以0 nmol/L唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理组或0μg/ml抗NEU3抗体处理组为空白对照组,以10、20、50 nmol/L DANA或0.5、1.0、2.0μg/ml抗NEU3抗体处理24 h或48 h后,采用CCK-8比色法、流式细胞术分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率,Western blotting法检测癌基因相关蛋白Ras蛋白和Bcl-2蛋白的表达水平.结果 免疫荧光染色结果显示,NEU3表达定位于MG-63细胞质中.作用48 h后,0、10、20、50 nmol/L DANA处理组细胞增殖抑制率分别为0、15.10% ±3.23% 、41.46% ±2.31% 、64.68% ±4.12%,差异具有统计学意义(F=99.90,P<0.001),不同DANA浓度组间两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05);0、0.5、1.0、2.0μg/ml抗NEU3抗体封闭处理48 h后,MG-63细胞增殖抑制率分别为0、9.34% ±1.53% 、19.66% ±4.18% 、42.50% ±5.68%,差异具有统计学意义(F=25.67,P<0.001),不同抗体浓度组间两两比较,除0.5μg/ml与1.0μg/ml组比较差异无统计学意义外(P>0.05),其余组间差异均具有统计学意义(均P<0.05).采用不同浓度DANA(0、10、20、50 nmol/L)处理MG
作者:杨晓;李思;彭锦;王琳;吴衣论;冯颖
来源:国际肿瘤学杂志 2019 年 46卷 4期