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从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGCT02,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702.用Bam HI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2~10 kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大肠杆菌E.coli DH5α中构建基因文库,利用七叶苷平板筛选到120个能产黑色水解圈的阳性克隆.将其中一个含3.5 kb左右大小的外源片段的阳性克隆子进行测序,结果发现其中含有一个1 347 bp大小的完整ORF框,进一步分析表明该片段编码448个氨基酸组成的蛋白质,氨基酸序列与来自Clostridium cellulovorans 743B(登录号为EES30417.1)的β-葡萄糖苷酶具有48

作者:申佩弘;蒋承建;杨霞;沈建涛;武波

来源:工业微生物 2011 年 41卷 1期

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作者:
申佩弘;蒋承建;杨霞;沈建涛;武波
来源:
工业微生物 2011 年 41卷 1期
标签:
WGC702 筛选 基因文库 β-葡萄糖苷酶基因 克隆
从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGCT02,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702.用Bam HI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2~10 kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大肠杆菌E.coli DH5α中构建基因文库,利用七叶苷平板筛选到120个能产黑色水解圈的阳性克隆.将其中一个含3.5 kb左右大小的外源片段的阳性克隆子进行测序,结果发现其中含有一个1 347 bp大小的完整ORF框,进一步分析表明该片段编码448个氨基酸组成的蛋白质,氨基酸序列与来自Clostridium cellulovorans 743B(登录号为EES30417.1)的β-葡萄糖苷酶具有48

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