目的考察细胞外信号调节激酶(ERK)、 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等不同激酶途径在五味子提取物(FSE)激活核因子相关因子(Nrf2)信号通路中的作用。方法给予不同的蛋白酶抑制剂预处理2 h后再以FSE干扰24 h;采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Nrf2及下游靶基因HO-1、 NQO1、 P-gp、 MRP2 mRNA的表达; Western blotting法检测蛋白水平及Nrf2核转位。结果 RT-PCR结果显示: PD98059、 SB203580、 Rottlerin处理可抑制FSE对HO-1、NQO1、 P-gp、 MRP2 mRNA的诱导作用,但仅SB203580、 Rottlerin处理可抑制FSE对Nrf2 mRNA的表达。 Western blotting结果显示: PD98059、 SB203580、 Rottlerin处理可抑制FSE对HO-1、 P-gp蛋白的诱导作用;各抑制剂处理后均能诱导胞浆中Nrf2蛋白的表达,但PD98059、 SB203580处理可抑制Nrf2核转位。结论 FSE激活Nrf2信号通路机制可能与ERK、p38MAPK直接磷酸化Nrf2,促进Nrf2入核增加其核聚积有关。
作者:于洋;赖巧;何昌强;何金莲;高洁
来源:广州中医药大学学报 2014 年 6期