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目的:研究miR-129-5p调控HMGB1表达在胰腺癌细胞凋亡中的作用.方法:以未处理的胰腺癌SW1990 细胞作为对照组(Control组),用脂质体转染法将mimics-NC(空载体)、miR-129-5p mimics、inhibitor-NC(空载体)、miR-129-5p inhibitor分别转染SW1990细胞作为mimics-NC组、miR-129-5p 过表达组(miR-129-5p mimics组)、inhibitor-NC组、miR-129-5p 低表达组(miR-129-5p inhibitor组),通过在线靶基因预测网站Target genes预测miR-129-5p与HMGB1是否存在结合位点,双荧光素酶基因报告实验验证miR-129-5p与HMGB1的靶向关系.采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-129-5p的表达水平,Western blot法检测HMGB1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2表达.Hoechst染色观察细胞凋亡变化.结果:与mimics-NC组及Control组比较,miR-129-5p mimics转染显著上调miR-129-5p水平(P<0.01),抑制HMGB1(P<0.01)、Bcl-2(P<0.05)蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05),促进细胞凋亡;与inhibitor-NC组及Control组比较,miR-129-5p inhibitor转染显著下调miR-129-5p水平(P<0.05),促进HMGB1、Bcl-2蛋白表达(均P<0.05),抑制Caspase-3蛋白表达(P<0.01),抑制细胞凋亡.双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-129-5p可抑制野生型HMGB1 细胞的荧光活性,靶向调控HM

作者:王语阳;苏拾香;覃宗帅;岑兰英;黄秀权;黄桂香;徐键;覃月秋

来源:海南医学院学报 2023 年 29卷 22期

知识库介绍

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王语阳;苏拾香;覃宗帅;岑兰英;黄秀权;黄桂香;徐键;覃月秋
来源:
海南医学院学报 2023 年 29卷 22期
标签:
miR-129-5p HMGB1 细胞凋亡 胰腺癌 miR-129-5p HMGB1 Apoptosis Pancreatic cancer
目的:研究miR-129-5p调控HMGB1表达在胰腺癌细胞凋亡中的作用.方法:以未处理的胰腺癌SW1990 细胞作为对照组(Control组),用脂质体转染法将mimics-NC(空载体)、miR-129-5p mimics、inhibitor-NC(空载体)、miR-129-5p inhibitor分别转染SW1990细胞作为mimics-NC组、miR-129-5p 过表达组(miR-129-5p mimics组)、inhibitor-NC组、miR-129-5p 低表达组(miR-129-5p inhibitor组),通过在线靶基因预测网站Target genes预测miR-129-5p与HMGB1是否存在结合位点,双荧光素酶基因报告实验验证miR-129-5p与HMGB1的靶向关系.采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-129-5p的表达水平,Western blot法检测HMGB1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2表达.Hoechst染色观察细胞凋亡变化.结果:与mimics-NC组及Control组比较,miR-129-5p mimics转染显著上调miR-129-5p水平(P<0.01),抑制HMGB1(P<0.01)、Bcl-2(P<0.05)蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05),促进细胞凋亡;与inhibitor-NC组及Control组比较,miR-129-5p inhibitor转染显著下调miR-129-5p水平(P<0.05),促进HMGB1、Bcl-2蛋白表达(均P<0.05),抑制Caspase-3蛋白表达(P<0.01),抑制细胞凋亡.双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-129-5p可抑制野生型HMGB1 细胞的荧光活性,靶向调控HM

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