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目的 探讨一氧化氮(NO)诱导星形胶质细胞(ASTs)低氧诱导因子-1α(HIF-1α)活化表达的作用.方法 分离新生大鼠大脑ASTs和成年大鼠大脑微血管内皮细胞(MECs),并进行体外原代培养.分别给予ASTs细胞DETA NONOATE预处理和与MECs共培养,观测ASTs细胞HIF-1α活化表达水平的变化.结果 常氧条件下,ASTs给予0.8、1.0 mmol/L DETA NONOATE预处理12 h后,HIF-1α蛋白水平高于未给药组(P<0.01);1.0 mmol/L DETA NONOATE给药预处理12、24 h后,HIF-1α蛋白水平高于未给药组(P<0.01).常氧和低氧组MECs细胞NO释放水平高于ASTs,且MECs在低氧条件下高于常氧组(P<0.01).常氧条件下,MECs给予内皮型一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂L-NAME(100μmol/L)预处理后,NO释放水平降低(P<0.01).MECs和ASTs共培养后,共培养组ASTs细胞HIF-1α蛋白水平较ASTs单独培养组增高(P<0.01);共培养组给予L-NAME(100μmol/L)预处理后,ASTs中HIF-1α蛋白水平与ASTs单独培养组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 本研究初步观测到体外培养的ASTs在给予2种来源NO后均可诱导HIF-1α活化.

作者:董越;王朝驹;王德伟;王黎;李凯;伏建峰;史清海

来源:解放军医药杂志 2020 年 32卷 10期

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作者:
董越;王朝驹;王德伟;王黎;李凯;伏建峰;史清海
来源:
解放军医药杂志 2020 年 32卷 10期
标签:
一氧化氮 低氧诱导因子-1α 星形胶质细胞 微血管内皮细胞 原代细胞培养 大鼠,Wistar
目的 探讨一氧化氮(NO)诱导星形胶质细胞(ASTs)低氧诱导因子-1α(HIF-1α)活化表达的作用.方法 分离新生大鼠大脑ASTs和成年大鼠大脑微血管内皮细胞(MECs),并进行体外原代培养.分别给予ASTs细胞DETA NONOATE预处理和与MECs共培养,观测ASTs细胞HIF-1α活化表达水平的变化.结果 常氧条件下,ASTs给予0.8、1.0 mmol/L DETA NONOATE预处理12 h后,HIF-1α蛋白水平高于未给药组(P<0.01);1.0 mmol/L DETA NONOATE给药预处理12、24 h后,HIF-1α蛋白水平高于未给药组(P<0.01).常氧和低氧组MECs细胞NO释放水平高于ASTs,且MECs在低氧条件下高于常氧组(P<0.01).常氧条件下,MECs给予内皮型一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂L-NAME(100μmol/L)预处理后,NO释放水平降低(P<0.01).MECs和ASTs共培养后,共培养组ASTs细胞HIF-1α蛋白水平较ASTs单独培养组增高(P<0.01);共培养组给予L-NAME(100μmol/L)预处理后,ASTs中HIF-1α蛋白水平与ASTs单独培养组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 本研究初步观测到体外培养的ASTs在给予2种来源NO后均可诱导HIF-1α活化.

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