目的 观察程氏蠲痹汤(JBT)对TNF-α诱导的滑膜成纤维细胞(FLS)焦亡的抑制作用及其分子机制.方法 以FLS为研究对象,按CCK8实验结果将其分为A:FLS组;B:TNF-α+FLS组;C:TNF-α+FLS+JBT组(最佳程氏蠲痹汤剂量).电镜观察细胞形态,使用乳酸脱氢酶(LDH)释放测定各组质膜孔隙形成的情况,采用RT-qPCR、Western Blot(WB)实验观察各组细胞中细胞标志基因、蛋白的表达,CO-IP检测NLRP3和Caspase-1相互作用.结果 CCK 8实验结果发现JBT冻干粉浓度在0.5 mg/mL,培养48 h效果最佳.透射电镜显示总体病变程度B组＜C组＜A组.与B组相比,C组的LDH漏出率显著降低(P＜0.01),C组和A组相比,LDH漏出率差异无统计学意义(P＞0.05).RT-qPCRAWB结果显示,A组和C组、B组相比,NLRP3、Caspase-l、IL-18、IL-lβmRNA及蛋白表达上调(P＜0.01),与B组相比,C组的NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1βmRNA及蛋白的表达下调(P＜0.01).根据灰度值的读取结果IP组模型与药物的差异程度与Input组内模型与药物的差异程度存在差异性,表明JBT可在一定程度上影响NLRP3和Caspase-1的结合.结论 程氏蠲痹汤通过下调NLRP3/Caspase-1细胞焦亡信号通路而抑制TNF-α诱导的滑膜成纤维细胞焦亡.

作者：孙广瀚；朱俊；许霞；万磊；南淑玲；王玉凤；赵黎；程卉；王坤；方妍妍；孙朗

来源：湖北中医药大学学报 2023 年 25卷 4期