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目的 评价转G2-EPSPS和GAT基因耐草甘膦大豆中的外源基因重组蛋白G2-EPSPS和GAT在模拟胃肠液中的消化稳定性.方法 建立体外模拟胃肠环境的消化体系,样品或对照蛋白以5g/L的浓度进行模拟胃液消化,以2g/L的浓度进行模拟肠液消化.分别于反应0 s、15 s、2 min、30 min和60 min时取200μl模拟消化液,加入上样缓冲液并沸水浴5 min终止反应,然后取样进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,并进行蛋白印迹(Western blot)分析.结果 G2-EPSPS和GAT重组蛋白在模拟胃、肠液中均在0~15 s内完全消化,SDS-PAGE电泳与Western blot未检测到蛋白残留.结论 耐草甘膦转基因大豆的外源基因重组蛋白G2-EPSPS和GAT在模拟胃肠液体系中极易被消化.

作者:秦文;王丽媛;杨倬;王晶波;卓勤;李岩

来源:环境与健康杂志 2020 年 37卷 7期

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作者:
秦文;王丽媛;杨倬;王晶波;卓勤;李岩
来源:
环境与健康杂志 2020 年 37卷 7期
标签:
转基因大豆 G2-EPSPS蛋白 GAT蛋白 模拟胃液 模拟肠液 消化稳定性
目的 评价转G2-EPSPS和GAT基因耐草甘膦大豆中的外源基因重组蛋白G2-EPSPS和GAT在模拟胃肠液中的消化稳定性.方法 建立体外模拟胃肠环境的消化体系,样品或对照蛋白以5g/L的浓度进行模拟胃液消化,以2g/L的浓度进行模拟肠液消化.分别于反应0 s、15 s、2 min、30 min和60 min时取200μl模拟消化液,加入上样缓冲液并沸水浴5 min终止反应,然后取样进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,并进行蛋白印迹(Western blot)分析.结果 G2-EPSPS和GAT重组蛋白在模拟胃、肠液中均在0~15 s内完全消化,SDS-PAGE电泳与Western blot未检测到蛋白残留.结论 耐草甘膦转基因大豆的外源基因重组蛋白G2-EPSPS和GAT在模拟胃肠液体系中极易被消化.

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