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目的:建立人腹膜间皮细胞(HPMC)培养模型,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素(IL-8)的表达.方法:采用胰蛋白酶-EDTA消化法,从人的腹膜组织中分离HPMC.采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(即SP法),对培养细胞进行鉴定.采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子(TGF)β1表达.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC IL-8 mRNA和FN mRNA的表达.结果:光镜示细胞融合后呈多边形,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白,波形蛋白,胶原Ⅲ,FN,TGFβ1蛋白,Ⅷ因子、胶原V表达阴性.人腹膜间皮细胞亦表达FN mRNA和IL-8 mRNA.结论:HPMC培养模型的建立,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL-8在腹膜透析中的作用提供理论依据.

作者:刘伏友;段绍斌;龙志高;肖平;陈星;潘乾;罗季安;彭佑铭

来源:湖南医科大学学报 2001 年 26卷 4期

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作者:
刘伏友;段绍斌;龙志高;肖平;陈星;潘乾;罗季安;彭佑铭
来源:
湖南医科大学学报 2001 年 26卷 4期
标签:
间皮细胞 基质 转化生长因子β1 白细胞介素-8 细胞培养
目的:建立人腹膜间皮细胞(HPMC)培养模型,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素(IL-8)的表达.方法:采用胰蛋白酶-EDTA消化法,从人的腹膜组织中分离HPMC.采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(即SP法),对培养细胞进行鉴定.采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子(TGF)β1表达.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC IL-8 mRNA和FN mRNA的表达.结果:光镜示细胞融合后呈多边形,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白,波形蛋白,胶原Ⅲ,FN,TGFβ1蛋白,Ⅷ因子、胶原V表达阴性.人腹膜间皮细胞亦表达FN mRNA和IL-8 mRNA.结论:HPMC培养模型的建立,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL-8在腹膜透析中的作用提供理论依据.

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