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目的:研究NDRG2基因与去泛素化酶Zc3h12d在NF-κB转导通路中的调控机制.方法:采用LPS刺激人支气管气道上皮16HBE细胞株来构建炎性刺激时气道黏液高分泌模型,用瞬时转染过表达NDRG2基因和Zc3h12dsiRNA干扰下调16HBE细胞,将细胞分成LPS+瞬时转染过表达NDRG2组(A组)、LPS+瞬时转染过表达NDRG2+Zc3h12d siRNA组(B组)、LPS+瞬时转染Zc3h12dsiRNA组(C组)、LPS+转染空白载体组(D组),以未做任何处理的16HBE细胞作为对照组(E组).反转录PCR检测气道黏蛋白(mucin,MUC)5AC mRNA的表达水平,ELISA法检测IL-1β、IL-6等炎症因子及MUC5AC的分泌水平,Western印迹检测Zc3h12d和NF-κB p65的分泌水平,激光共聚焦法检测16HBE细胞内MUC5AC表达.结果:与B组比较,A组炎症因子及MUC5AC表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);而B组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05).与D组比较,A组炎症因子及MUC5AC的表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).D组与E组比较,LPS刺激后炎症因子及MUC5AC分泌增多,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:NDRG2基因可以通过Zc3h12d而实现对NF-κB转导通路的调控.

作者:石萌萌;李琪;周向东;黄华平;王杰

来源:中南大学学报(医学版) 2016 年 41卷 1期

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作者:
石萌萌;李琪;周向东;黄华平;王杰
来源:
中南大学学报(医学版) 2016 年 41卷 1期
标签:
NF-κB NDRG2 Zc3h12d 黏蛋白5AC NF-κB NDRG2 Zc3h12d mucin 5AC
目的:研究NDRG2基因与去泛素化酶Zc3h12d在NF-κB转导通路中的调控机制.方法:采用LPS刺激人支气管气道上皮16HBE细胞株来构建炎性刺激时气道黏液高分泌模型,用瞬时转染过表达NDRG2基因和Zc3h12dsiRNA干扰下调16HBE细胞,将细胞分成LPS+瞬时转染过表达NDRG2组(A组)、LPS+瞬时转染过表达NDRG2+Zc3h12d siRNA组(B组)、LPS+瞬时转染Zc3h12dsiRNA组(C组)、LPS+转染空白载体组(D组),以未做任何处理的16HBE细胞作为对照组(E组).反转录PCR检测气道黏蛋白(mucin,MUC)5AC mRNA的表达水平,ELISA法检测IL-1β、IL-6等炎症因子及MUC5AC的分泌水平,Western印迹检测Zc3h12d和NF-κB p65的分泌水平,激光共聚焦法检测16HBE细胞内MUC5AC表达.结果:与B组比较,A组炎症因子及MUC5AC表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);而B组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05).与D组比较,A组炎症因子及MUC5AC的表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).D组与E组比较,LPS刺激后炎症因子及MUC5AC分泌增多,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:NDRG2基因可以通过Zc3h12d而实现对NF-κB转导通路的调控.

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