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目的:观察CAV、VP3基因在H22细胞中的凋亡诱导情况.方法:用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建含VP3基因的重组体;在体外,利用Lipofect AMINETM介导的基因转染法,将pcDNA-VP3、pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H22中,RT-PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况.同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式.结果:酶切鉴定及测序分析表明,插入片段和预期相符,阳性重组体被命名为pcDNA-VP3;RT-PCR结果表明,转染后,VP3基因在细胞中得到了表达;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡.
作者：申志发；王宇哲；孙军；宗义强；屈伸
来源：武汉大学学报(医学版) 2003 年 24卷 1期
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