目的 观察并评价基因转染后牙龈成纤维细胞(GF)表达外源目的 基因人转化生长因子-β1(hTGF-β1)对其分化、成骨特性的影响.方法 采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测方法检测转染对GF ALP活性的影响,免疫组化染色及图像分析评价基因转染后骨钙素(OC)、骨桥素(OPN)、骨涎蛋白(BSP)、骨结合素(ON)含量的变化,体外矿化结节形成实验检测转染后细胞成骨特性的变化.结果 转染后GF的ALP活性较未转染组有显著的提高(P<0.05),并且与牙周膜成纤维细胞(PDLCs)的ALP活性接近(P0.05).OC含量检测显示转染后GF的OC含量与未转染组和PDLCs组相比,其差异均无统计学意义(P<0.05).免疫组化染色后,转染组GF所表达的OPN、ON、BSP含量均高于未转染组GF(P<0.05),而与PDLCs间差异无统计学意义(P0.05).第21天和第24天时,在矿化液作用下PDLCs及转染GF在倒置显微镜下可见致密的结节形成,von Kossa染色可见紫色的矿化结节形成.未转染GF未见结节形成.而转染GF在未经矿化液诱导情况下,虽出现显著的细胞聚集,但VOH Kossa染色未见紫色矿化结节形成.结论 转染pcDNA3-hTGF-β1后的GF可表达一定的成骨细胞特性,但这种成骨特性有限.
作者:储庆;吴织芬;王勤涛;何海丽;万玲;刘玲侠
来源:华西口腔医学杂志 2009 年 27卷 3期