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目的 探讨Wnt经典通路相关因子Dickkopf蛋白1(DKK-1)、β-链蛋白(β-catenin)在糖基化终末产物(AGEs)介导的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)骨分化过程中的变化.方法 通过体外组织块法和有限稀释法克隆化培养获取hPDLSCs,实验分两组:正常hPDLSCs组(N-hPDLSCs组)和AGEs刺激的正常hPDLSCs组(A-hPDLSCs组).对2组细胞成骨矿化诱导后行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色;实时聚合酶链反应(real time PCR)检测成骨基因,以及Wnt经典通路中相关因子DKK-1、β-catenin;Westem blot检测相关成骨蛋白、细胞核蛋白β-catenin.结果 成骨诱导后,A-hPDLSCs组ALP染色明显浅于N-hPDLSCs组;茜素红染色A-hPDLSCs组钙化结节少于N-hPDLSCs组;real time PCR与Western blot的结果显示A-hPDLSCs组BSP、ALP、Runx-2的表达都较低,差异有统计学意义(P<0.05).Wnt经典信号通路中相关因子:A-hPDLSCs组β-catenin表达高于N-hPDLSCs组,A-hPDLSCs组DKK-1表达明显低于N-hPDLSCs组,并且Weston blot显示A-hPDLSCs组核蛋白β-catenin的表达高于N-hPDLSCs组.结论 AGEs可以使hPDLSCs骨向分化过程中Wnt经典通路的抑制因子DKK-1下调,细胞核中的β-catenin表达升高,激活了Wnt经典通路,并且抑制了骨分化.

作者:伍燕;邓超;杨琨;崔晓霞;刘琪;金岩

来源:华西口腔医学杂志 2015 年 33卷 6期

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作者:
伍燕;邓超;杨琨;崔晓霞;刘琪;金岩
来源:
华西口腔医学杂志 2015 年 33卷 6期
标签:
糖基化终末产物 人牙周膜干细胞 骨向分化 Wnt经典通路 advanced glycation end products human periodontal ligament stem cells osteogenic differentiation classical Wnt pathway
目的 探讨Wnt经典通路相关因子Dickkopf蛋白1(DKK-1)、β-链蛋白(β-catenin)在糖基化终末产物(AGEs)介导的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)骨分化过程中的变化.方法 通过体外组织块法和有限稀释法克隆化培养获取hPDLSCs,实验分两组:正常hPDLSCs组(N-hPDLSCs组)和AGEs刺激的正常hPDLSCs组(A-hPDLSCs组).对2组细胞成骨矿化诱导后行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色;实时聚合酶链反应(real time PCR)检测成骨基因,以及Wnt经典通路中相关因子DKK-1、β-catenin;Westem blot检测相关成骨蛋白、细胞核蛋白β-catenin.结果 成骨诱导后,A-hPDLSCs组ALP染色明显浅于N-hPDLSCs组;茜素红染色A-hPDLSCs组钙化结节少于N-hPDLSCs组;real time PCR与Western blot的结果显示A-hPDLSCs组BSP、ALP、Runx-2的表达都较低,差异有统计学意义(P<0.05).Wnt经典信号通路中相关因子:A-hPDLSCs组β-catenin表达高于N-hPDLSCs组,A-hPDLSCs组DKK-1表达明显低于N-hPDLSCs组,并且Weston blot显示A-hPDLSCs组核蛋白β-catenin的表达高于N-hPDLSCs组.结论 AGEs可以使hPDLSCs骨向分化过程中Wnt经典通路的抑制因子DKK-1下调,细胞核中的β-catenin表达升高,激活了Wnt经典通路,并且抑制了骨分化.

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