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目的 探讨外源性wnt5α基因修饰的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,bMSCs)支持骨髓造血及抑制白血病细胞HL60生长的双重作用,为白血病治疗提供新的思路.方法 用流式细胞仪鉴定所培养的bMSCs,重组腺病毒Ad5-wnt5α对bMSCs进行基因修饰,RT-PCR检测wnt5α的表达,流式细胞仪检测wnt5α基因修饰bMSCs的效率.描绘不同处理组(bMSCs组,Ad5-GFP组,Ad5-wnt5α组)的细胞生长曲线.采用外源性wnt5α基因修饰的bMSCs与HL60细胞共培养的方法,利用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测各处理组(HL60细胞组,HL60+bMSCs组,HL60+Ad5-GFP组,HL60+Ad5-wnt5α组)细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68以及细胞分化周期的变化.结果 腺病毒成功将外源性wnt5α基因转染bMSCs;HL60+Ad5-wnt5α组细胞单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68表达高于对照组(P<0.05),而粒细胞系表面标志抗原CD13表达与对照比较差异无统计学意义(P>0.05);HL60+Ad5-wnt5α组细胞自第3 d开始,细胞周期阻滞在G2期.结论 外源性wnt5α促进bMSCs增殖,抑制HL60细胞的生长并可诱导HL60细胞向成熟方向分化.

作者:沈亚莉;徐酉华;罗庆;郭振华;郑改焕;郭玉霞

来源:四川大学学报(医学版) 2010 年 41卷 6期

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沈亚莉;徐酉华;罗庆;郭振华;郑改焕;郭玉霞
来源:
四川大学学报(医学版) 2010 年 41卷 6期
标签:
wnt5α 间充质干细胞 HL60细胞 诱导分化 基因修饰
目的 探讨外源性wnt5α基因修饰的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,bMSCs)支持骨髓造血及抑制白血病细胞HL60生长的双重作用,为白血病治疗提供新的思路.方法 用流式细胞仪鉴定所培养的bMSCs,重组腺病毒Ad5-wnt5α对bMSCs进行基因修饰,RT-PCR检测wnt5α的表达,流式细胞仪检测wnt5α基因修饰bMSCs的效率.描绘不同处理组(bMSCs组,Ad5-GFP组,Ad5-wnt5α组)的细胞生长曲线.采用外源性wnt5α基因修饰的bMSCs与HL60细胞共培养的方法,利用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测各处理组(HL60细胞组,HL60+bMSCs组,HL60+Ad5-GFP组,HL60+Ad5-wnt5α组)细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68以及细胞分化周期的变化.结果 腺病毒成功将外源性wnt5α基因转染bMSCs;HL60+Ad5-wnt5α组细胞单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68表达高于对照组(P<0.05),而粒细胞系表面标志抗原CD13表达与对照比较差异无统计学意义(P>0.05);HL60+Ad5-wnt5α组细胞自第3 d开始,细胞周期阻滞在G2期.结论 外源性wnt5α促进bMSCs增殖,抑制HL60细胞的生长并可诱导HL60细胞向成熟方向分化.

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