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目的为进一步研究狂犬病毒糖蛋白和核蛋白免疫活性位点的免疫特性,构建了大肠杆菌重组质粒载体.方法参考有关文献及用蛋白质亲疏水性分析程序分析狂犬病毒糖蛋白、核蛋白,以确定目的基因,用分子克隆的方法将目的基因片段插入质粒载体,最后测定重组质粒的核酸序列.结果在大肠杆菌质粒PUC18多克隆位点EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ之间,根据其阅读框架,插入了含有狂犬病毒糖蛋白主要免疫活性位点的目的基因合成片段:GⅡ免疫活性位点的第149~160位氨基酸残基及GⅢ免疫活性位点的第331~340位氨基酸残基所对应的碱基序列.在KS质粒多克隆位点EcoRⅠ和BamHⅠ间,插入了狂犬病毒核蛋白-免疫活性位点第374~383位氨基酸残基所对应的碱基序列.结论为深入研究狂犬病毒免疫活性位点的免疫特性及其基因免疫打下基础.
作者:杨裕华;汪天虹;赵世立;解力
来源:疾病控制杂志 2003 年 7卷 3期
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