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目的 探讨TGF-β1诱导大肠癌HT29细胞发生上皮细胞间质转化(EMT)后对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响.方法 TGF-β1长期诱导HT29细胞,RT-PCR检测细胞E-钙黏素和波形蛋白mRNA的表达;HE和考马斯亮蓝染色后分别观察细胞形态和骨架;对HT29、经TGF-β1诱导发生EMT的HT29/TGF-β1和两者混合培养的细胞分别进行划痕实验;绿色荧光蛋白标记质粒转染HT29/TGF-β1细胞,红色的转染HT29细胞,两者混合培养进行划痕实验.结果 TGF-β1连续刺激10 d后HT29的Ecadherin表达显著下降,Vimentin表达显著上调(P<0.05);连续刺激40 d后,细胞变梭,细胞间连接不紧密.细胞蓝色丝网状结构的骨架蛋白明显增多,相邻细胞间骨架连接不如刺激前紧密;细胞划痕实验显示刺激后的HT29细胞迁移速度最快,HT29细胞最慢;转染后见红色和绿色的细胞在迁移生长的过程中分布均匀.结论 TGF-β1可诱导大肠癌细胞发生EMT;大肠癌中发生EMT的细胞可以加速非EMT细胞的侵袭转移速度.

作者:王雅娟;胡洁;赵海燕;韩慧霞

来源:基础医学与临床 2014 年 34卷 9期

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作者:
王雅娟;胡洁;赵海燕;韩慧霞
来源:
基础医学与临床 2014 年 34卷 9期
标签:
大肠癌 TGF-β1 EMT colorectal cancer EMT TGF-β1
目的 探讨TGF-β1诱导大肠癌HT29细胞发生上皮细胞间质转化(EMT)后对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响.方法 TGF-β1长期诱导HT29细胞,RT-PCR检测细胞E-钙黏素和波形蛋白mRNA的表达;HE和考马斯亮蓝染色后分别观察细胞形态和骨架;对HT29、经TGF-β1诱导发生EMT的HT29/TGF-β1和两者混合培养的细胞分别进行划痕实验;绿色荧光蛋白标记质粒转染HT29/TGF-β1细胞,红色的转染HT29细胞,两者混合培养进行划痕实验.结果 TGF-β1连续刺激10 d后HT29的Ecadherin表达显著下降,Vimentin表达显著上调(P<0.05);连续刺激40 d后,细胞变梭,细胞间连接不紧密.细胞蓝色丝网状结构的骨架蛋白明显增多,相邻细胞间骨架连接不如刺激前紧密;细胞划痕实验显示刺激后的HT29细胞迁移速度最快,HT29细胞最慢;转染后见红色和绿色的细胞在迁移生长的过程中分布均匀.结论 TGF-β1可诱导大肠癌细胞发生EMT;大肠癌中发生EMT的细胞可以加速非EMT细胞的侵袭转移速度.

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