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目的 为提高卡介苗对结核病的保护力,构建结核分枝杆茵mpt64-卡介苗重组疫苗.方法 采用基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原MPT64的编码基因与穿梭质粒pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗.结果 通过PCR扩增获得mpt64基因,与穿梭表达裁体pYUB295重组后,通过PCR扩增、酶切、DNA测序鉴定表明成功地构建了mpt54基因pYUB295重组质粒.将重组质粒通过电穿孔导入卡介苗,重组卡介苗在抗性培养基上生长良好.mpt64-卡介苗重组疫苗基因组DNA的PCR扩增及培养上清液PAGE电泳表明,mpt64-卡介苗重组疫苗构建正确,MPT64蛋白在卡介苗中分泌表达.结论 成功构建了mpt64-卡介苗重组疫苗.
作者：张灵霞；吴雪琼；董恩军
来源：解放军预防医学杂志 2007 年 25卷 6期
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