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目的 观察β淀粉样蛋白(Aβ)受体PirB对小鼠星形胶质细胞增殖和反应性增生的影响.方法 培养小鼠原代星形胶质细胞,将细胞分为对照组、Aβ组、Aβ+0.2 μmol/L PEP组、Aβ+0.4 μmol/L PEP组、Aβ+Fluspirilene组、Aβ +GFP-LV组和Aβ+mPirB-LV组.分别采用PirB的可溶性胞外段PEP或PirB抑制剂Fluspirilene处理星形胶质细胞,抑制内源性PirB受体;或采用慢病毒转染过表达PirB基因,其后给予Aβ1-42寡聚体处理.采用RTCA和EdU法观察细胞增殖情况,Real-time PCR检测星形胶质细胞反应性增生相关S-100钙结合蛋白B(S-100β)、波形蛋白(Vimentin)、巢蛋白(Nestin)、淀粉样前体蛋白(APP)的mRNA表达水平,Western blotting检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平.结果 RTCA法检 测结果显示,给药后各组标准化细胞指数(NCI)值均骤降,其后逐步升高并趋于平稳.EdU染色结果显示,与对照组比较,Aβ组星形胶质细胞增殖活性明显增强(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.2 μmol/L PEP组、Aβ+0.4 μmol/L PEP组和Aβ+ Fluspirilene组细胞增殖活性均明显降低(P<0.01或P<0.001).Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,Aβ组GFAP、S-100β、Vimentin、Nestin、APP和PirB的mRNA表达量均明显增高(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.4 μmol/L PEP组G

作者:赵沅杰;拓振杰;尚培骏;杨锦雯;张晓华

来源:解放军医学杂志 2024 年 49卷 1期

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作者:
赵沅杰;拓振杰;尚培骏;杨锦雯;张晓华
来源:
解放军医学杂志 2024 年 49卷 1期
标签:
阿尔茨海默病 反应性星形胶质细胞增生 PirB 星形胶质细胞 增殖 Alzheimer's disease reactive astrogliosis PirB astrocytes proliferation
目的 观察β淀粉样蛋白(Aβ)受体PirB对小鼠星形胶质细胞增殖和反应性增生的影响.方法 培养小鼠原代星形胶质细胞,将细胞分为对照组、Aβ组、Aβ+0.2 μmol/L PEP组、Aβ+0.4 μmol/L PEP组、Aβ+Fluspirilene组、Aβ +GFP-LV组和Aβ+mPirB-LV组.分别采用PirB的可溶性胞外段PEP或PirB抑制剂Fluspirilene处理星形胶质细胞,抑制内源性PirB受体;或采用慢病毒转染过表达PirB基因,其后给予Aβ1-42寡聚体处理.采用RTCA和EdU法观察细胞增殖情况,Real-time PCR检测星形胶质细胞反应性增生相关S-100钙结合蛋白B(S-100β)、波形蛋白(Vimentin)、巢蛋白(Nestin)、淀粉样前体蛋白(APP)的mRNA表达水平,Western blotting检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平.结果 RTCA法检 测结果显示,给药后各组标准化细胞指数(NCI)值均骤降,其后逐步升高并趋于平稳.EdU染色结果显示,与对照组比较,Aβ组星形胶质细胞增殖活性明显增强(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.2 μmol/L PEP组、Aβ+0.4 μmol/L PEP组和Aβ+ Fluspirilene组细胞增殖活性均明显降低(P<0.01或P<0.001).Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,Aβ组GFAP、S-100β、Vimentin、Nestin、APP和PirB的mRNA表达量均明显增高(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.4 μmol/L PEP组G

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