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目的 探讨移植神经调节蛋白1(NRG1)基因修饰的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓半横切损伤(SCI)的修复作用及其可能机制.方法 分离培养大鼠BMSCs,转染NRG1基因,采用ELISA法测定BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量,细胞计数法检测BMSCs增殖活性.43只健康8周龄SD大鼠,随机分为对照组(n=10)、SCI模型组(n=10)、BMSCs组(n=10)与NRG1-BMSCs组(n=13).建立大鼠脊髓半横切损伤模型后,原位移植BMSCs和NRG1-BMSCs.移植第1、7、14、21、28天,采用BBB评分、斜板实验评估大鼠后肢运动功能;移植第7天,应用荧光显微镜观察移植细胞迁移及分布情况;移植第28天,采用HE染色和Nissl染色观察大鼠脊髓组织病理学变化,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,Western blotting检测脊髓组织内质网应激相关蛋白[X-box结合蛋白1(XBP1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)]及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达.结果 成功分离培养BMSCs,并转染NRG1基因.ELISA法检测结果显示,NRG1-BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量明显高于BMSCs,且呈时间依赖性(P<0.05).NRG1-BMSCs增殖活性明显高于BMSCs(P<0.05).移植第21、28天,NRG1-BMSCs组BBB评分及斜板倾斜角度均

作者:符禹玄;陈君;赵富生;李媛媛;张可心;武庚

来源:解放军医学杂志 2024 年 49卷 2期

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作者:
符禹玄;陈君;赵富生;李媛媛;张可心;武庚
来源:
解放军医学杂志 2024 年 49卷 2期
标签:
脊髓半横切损伤 神经调节蛋白1 骨髓基质干细胞 内质网应激 凋亡 spinal cord hemi-transverse injury neureglin1 bone marrow mesenchymal stem cells endoplasmic reticulum stress apoptosis
目的 探讨移植神经调节蛋白1(NRG1)基因修饰的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓半横切损伤(SCI)的修复作用及其可能机制.方法 分离培养大鼠BMSCs,转染NRG1基因,采用ELISA法测定BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量,细胞计数法检测BMSCs增殖活性.43只健康8周龄SD大鼠,随机分为对照组(n=10)、SCI模型组(n=10)、BMSCs组(n=10)与NRG1-BMSCs组(n=13).建立大鼠脊髓半横切损伤模型后,原位移植BMSCs和NRG1-BMSCs.移植第1、7、14、21、28天,采用BBB评分、斜板实验评估大鼠后肢运动功能;移植第7天,应用荧光显微镜观察移植细胞迁移及分布情况;移植第28天,采用HE染色和Nissl染色观察大鼠脊髓组织病理学变化,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,Western blotting检测脊髓组织内质网应激相关蛋白[X-box结合蛋白1(XBP1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)]及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达.结果 成功分离培养BMSCs,并转染NRG1基因.ELISA法检测结果显示,NRG1-BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量明显高于BMSCs,且呈时间依赖性(P<0.05).NRG1-BMSCs增殖活性明显高于BMSCs(P<0.05).移植第21、28天,NRG1-BMSCs组BBB评分及斜板倾斜角度均

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