目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为心肌细胞的可行性.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSCs,应用bFGF对其定向诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白(desmin)、α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)、心肌特异性肌钙蛋白(C-TnT)的表达,透射电镜观察分化细胞的超微结构变化.在诱导后7d、21d和28d,3个时间点以半定量RT-PCR方法检测细胞心肌早期转录因子GATA4和心肌特异性α肌球蛋白重链(α-MHC)的表达.结果 原代细胞培养48 h后,大部分细胞呈梭形成纤维细胞状,并带有 2~3个长的突起,小部分细胞呈扁平形.给予bFGF诱导后,细胞形态发生明显变化,诱导1周的BMSCs体积增大呈肌细胞样短柱状或长梭形,平行排列生长,诱导4周的BMSCs细胞多呈短柱状,相邻细胞紧密接触形成类肌管样结构,排列具有明显的方向性.经bFGF诱导后分化的细胞胞质内desmin、α-actin和C-TnT染色均为阳性,其中α-actin、desmin阳性率较高分别为58.64
作者:王海萍;张雷;吕洋;吴志刚;王浩宇;邵素霞
来源:解剖学报 2011 年 42卷 6期