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目的:探讨用寡核苷酸芯片检测结核分枝杆菌耐利福平株的rpoB基因突变的可行性.方法:制备了检测耐利福平结核分枝杆菌寡核苷酸芯片,并且通过优化引物比例和杂交温度以获得最佳结果.应用该寡核苷酸芯片检测6例结核分枝杆菌的rpoB基因突变,并与测序结果比较.结果:不同引物比例PCR产物经热变性后杂交,杂交结果无明显差异.杂交温度可以影响杂交结果的特异性和杂交信号的强度.引物比例1∶1,杂交温度50℃为最佳条件.6例标本的芯片检测结果显示其中有1例野生型标本,5例突变标本:516位GAC→AAC,GTC,TAC,GAG,531位TCG→TTG.其结果与测序结果完全相符.结论:寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐药结核病快速诊断的一种有效方法.
作者：谢弋；丁雨；黄坚；王升启
来源：军事医学科学院院刊 2003 年 27卷 5期
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