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目的 探索核磷素1(NPM1)基因对胆管癌细胞系Huh28和RBE的细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨NPM1影响胆管癌的作用机制.方法 采用瞬时转染将包含NPM1基因的过表达重组质粒转染胆管癌细胞系Huh28和RBE以过表达NPM1,采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染Huh28和RBE以敲低NPM1,并使用Western印迹实验检测其中NPM1蛋白的表达水平,以验证过表达和敲低NPM1的效果.采用CCK-8法和Transwell法分别检测细胞增殖和迁移能力;采用实时定量PCR(qPCR)及Western印迹实验,检测上皮-间质转化(EMT)过程中相关分子的mRNA及蛋白表达水平,包括钙黏蛋白1(CDH1)、钙黏蛋白2(CDH2)、β连环蛋白1(CTNNB1)和波形蛋白(VIM);采用Log-rank检验比较NPM1高、低表达组胆管癌患者的生存期差异.结果 敲低NPM1可抑制Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,而过表达NPM1则促进Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力.过表达NPM1促进Huh28和RBE细胞的EMT过程,而敲低NPM1则抑制Huh28和RBE细胞的EMT过程.NPM1在胆管癌组织中上调表达,NPM1的表达水平与胆管癌患者的生存期无相关性.结论 NPM1通过激活EMT信号通路促进胆管癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力,在胆管癌的发生发展中可能发挥癌基因的功能.

作者:张争;曾继峰;刘信燚;王亚会;王翠玲;周钢桥

来源:军事医学 2022 年 46卷 12期

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作者:
张争;曾继峰;刘信燚;王亚会;王翠玲;周钢桥
来源:
军事医学 2022 年 46卷 12期
标签:
胆管癌 核磷素1 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 上皮-间质转化
目的 探索核磷素1(NPM1)基因对胆管癌细胞系Huh28和RBE的细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨NPM1影响胆管癌的作用机制.方法 采用瞬时转染将包含NPM1基因的过表达重组质粒转染胆管癌细胞系Huh28和RBE以过表达NPM1,采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染Huh28和RBE以敲低NPM1,并使用Western印迹实验检测其中NPM1蛋白的表达水平,以验证过表达和敲低NPM1的效果.采用CCK-8法和Transwell法分别检测细胞增殖和迁移能力;采用实时定量PCR(qPCR)及Western印迹实验,检测上皮-间质转化(EMT)过程中相关分子的mRNA及蛋白表达水平,包括钙黏蛋白1(CDH1)、钙黏蛋白2(CDH2)、β连环蛋白1(CTNNB1)和波形蛋白(VIM);采用Log-rank检验比较NPM1高、低表达组胆管癌患者的生存期差异.结果 敲低NPM1可抑制Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,而过表达NPM1则促进Huh28和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力.过表达NPM1促进Huh28和RBE细胞的EMT过程,而敲低NPM1则抑制Huh28和RBE细胞的EMT过程.NPM1在胆管癌组织中上调表达,NPM1的表达水平与胆管癌患者的生存期无相关性.结论 NPM1通过激活EMT信号通路促进胆管癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力,在胆管癌的发生发展中可能发挥癌基因的功能.

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