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以捕食线虫真菌少孢节丛孢Arthrobotrys oligospora YMF 1.03170为研究材料,通过优化sgRNA表达驱动体系tRNAGly,构建CRISPR/Cas9基因编辑系统,成功获得基因定点编辑菌株.将该CRISPR/Cas9系统与同源重组相结合,可精确地对两个目的 氨基酸编码基因同时进行定点置换.结合代谢图谱及前体化合物饲喂实验,发现6-甲基水杨酸合酶编码蛋白新的活性位点Arg17、Arg18、His33和His34.本研究将CRISPR/Cas9基因编辑系统应用在少孢节丛孢中,并成功建立基因编辑精细体系,为快速构建少孢节丛孢的遗传转化体系和研究该菌的基因功能提供有效方法.
作者：贺志强；岳熙桐；黄为平；张克勤；牛雪梅
来源：菌物学报 2021 年 40卷 9期
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