目的：提取和分离纯化白花鬼针草花粉主要过敏原，并鉴定主要过敏原的致敏性。方法提取白花鬼针草花粉蛋白粗提液，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离粗提液蛋白组分并测定其分子质量，经离子交换层析法分离纯化几类主要的蛋白，Western blotting分别检测其与花粉过敏患者血清 IgE结合情况及10位正常人阴性混合血清结合情况，对比鉴定每种主要蛋白质致敏原的致敏性。结果 SDS-PAGE 结果示：在12．5～120 ku之间广泛分布了20余条蛋白条带，其中主带7条，分子质量在35～70 ku和10～15 ku的区带蛋白含量最为丰富，余下的范围内还有约10余条次带。Westen-blotting检测示：白花鬼针草花粉变应原的致敏性强，与花粉过敏患者血清特异性 IgE结合大。离子交换层析出6类主要变应原蛋白，其分子质量分别为70、65、54、49、39及33 ku；阴性对照组 Westen-blotting在70 ku处有弱显色。结论白花鬼针草花粉的主要过敏原为70、65、54、49、39及33 ku；70 ku变应原致敏性最强。
作者：李莹；肖小军；柴文戍；何韶衡；杨平常；刘志刚
来源：南昌大学学报（医学版） 2014 年 6期
