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目的 研究后肢缺血预处理对热休克蛋白70在脊髓损伤后表达的影响.方法 SD大鼠随机(随机数字法)分为3组(20只/组):假手术组大鼠予椎板切除,损伤组大鼠脊髓受到撞击伤(5 g×10 cm),缺血预处理组在大鼠受到损伤前8 h对下肢进行缺血预处理.损伤通过改良Allen法进行,双下肢痉挛和摆尾为成功标志.缺血预处理通过驱血带阻断下肢血流10 min放开10 min.两侧下肢交替进行,每侧进行3次.在损伤24 h和48 h后,用RT-PCR、免疫组织化学和原位杂交技术,观察HSP70 mRNA及蛋白的变化.各组数据用SPSS 15.0统计软件包进行方差分析(one-way ANOVA).结果 假手术组大鼠脊髓组织中检测到很弱的HSP70 mRNA表达.损伤和预处理组HSP70表达增强,阳性细胞较多,以中央灰质阳性神经元分布较密集.两个时间点mRNA表达水平预处理组(22.18±3.69,14.15±4.18)高于损伤组(13.97±4.46,8.73±3.55),差异具有统计学意义(F=16.06,P=0.005和F=7.43,P=0.028);两个时间点蛋白表达预处理组(16.71±4.02,9.85±2.20)高于损伤组(14.85±3.73,8.78±2.05)差异有统计学意义(F=90.13,P=0.032和F=34.70,P=0.036).结论 下肢缺血预处理能增加损伤脊髓HSP70的转录和表达,增加神经保护作用.

作者:刘锦波;龚爱华;张志坚

来源:中华急诊医学杂志 2011 年 20卷 4期

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作者:
刘锦波;龚爱华;张志坚
来源:
中华急诊医学杂志 2011 年 20卷 4期
标签:
脊髓损伤 热休克蛋白70 原位分子杂交 免疫组织化学 后肢缺血预处理 RT-PCR Spinal cord injury Heat shock protein70 Hybridization in situ Immunohistochemistry Hindlimb ischaemic preconditioning RT-PCR
目的 研究后肢缺血预处理对热休克蛋白70在脊髓损伤后表达的影响.方法 SD大鼠随机(随机数字法)分为3组(20只/组):假手术组大鼠予椎板切除,损伤组大鼠脊髓受到撞击伤(5 g×10 cm),缺血预处理组在大鼠受到损伤前8 h对下肢进行缺血预处理.损伤通过改良Allen法进行,双下肢痉挛和摆尾为成功标志.缺血预处理通过驱血带阻断下肢血流10 min放开10 min.两侧下肢交替进行,每侧进行3次.在损伤24 h和48 h后,用RT-PCR、免疫组织化学和原位杂交技术,观察HSP70 mRNA及蛋白的变化.各组数据用SPSS 15.0统计软件包进行方差分析(one-way ANOVA).结果 假手术组大鼠脊髓组织中检测到很弱的HSP70 mRNA表达.损伤和预处理组HSP70表达增强,阳性细胞较多,以中央灰质阳性神经元分布较密集.两个时间点mRNA表达水平预处理组(22.18±3.69,14.15±4.18)高于损伤组(13.97±4.46,8.73±3.55),差异具有统计学意义(F=16.06,P=0.005和F=7.43,P=0.028);两个时间点蛋白表达预处理组(16.71±4.02,9.85±2.20)高于损伤组(14.85±3.73,8.78±2.05)差异有统计学意义(F=90.13,P=0.032和F=34.70,P=0.036).结论 下肢缺血预处理能增加损伤脊髓HSP70的转录和表达,增加神经保护作用.

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