目的 利用体外实验研究线粒体DNA (mtDNA)在百革枯(PQ)致病机理中的作用.方法 首先用PQ处理人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549细胞),应用CCK-8法检测细胞生存率,然后利用绝对定量PCR的方法检测培养上清液中mtDNA的含量,以激光共聚焦成像法检测线粒体膜电位来验证PQ对线粒体的损伤作用.接着通过Transwell趋化实验检测mtDNA对入外周血单个核细胞(PBMC)及中性粒细胞(PMN)的趋化活性,并用流式细胞术确定趋化细胞的亚型.同时应用Xcelligence系统和体外血管通透性试剂盒检测了mtDNA对血管通透性的影响.最后验证mtDNA在细胞增殖方面的作用.结果 PQ致A549细胞损伤的半数致死浓度为600 μmol/L,且A549细胞的生存率及对线粒体的损伤存在浓度和时间依赖关系(P＜0.05).PQ致细胞损伤释放出的mtDNA可以非特异地趋化单核细胞,但在血管通透性方面没有影响.并且mtDNA不能直接刺激人成纤维细胞的增殖,但可以引起主要的促纤维化因子TGF-β1的增加,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 PQ损伤细胞释放的mtDNA在PQ所致炎症及增殖反应中起着重要的作用.
作者：陈丽；朱长清；陈怡
来源：中华急诊医学杂志 2013 年 22卷 12期
