目的：通过观察热打击诱导活性氧（reactive oxygen species，ROS）爆发性增多对神经元细胞凋亡的影响，探讨重症中暑所致脑损害的发病机理。方法建立神经元细胞热打击模型，对照组将细胞置于标准37℃、5％CO2细胞培养箱，热打击组将细胞置于43℃细胞培养箱中热打击2 h，热打击后继续37℃、5％CO2细胞培养箱孵育，DCFH法检测热打击后0 h、0.5 h、1 h、2 h细胞内ROS含量；Annexin V-FITC/PI双染色方法和Westen blot检测热打击后0 h、3 h、6 h、12 h细胞凋亡率及caspase-3蛋白表达，同时检测ROS特异性清除剂MnTMPyP对热打击后12 h细胞凋亡的影响。结果与对照组比较，43℃热打击后0 h细胞内ROS增加，2 hROS呈爆发性增多（P＜0.05）；43℃热打击后3 h神经元细胞开始出现凋亡，12 h 诱导大量凋亡（43.2％，P＜0.05）、caspase-3蛋白表达明显增加（P＜0.05），其趋势与细胞凋亡趋势一致；MnTMPyP明显抑制了43℃热打击后12 h神经元细胞凋亡率（47.42％降至18.45％，P＜0.05）及caspase-3蛋白的表达。结论 ROS作为上游信号分子介导了热打击诱导的神经元细胞凋亡，但其介导神经元细胞凋亡的中间机制尚需进一步研究。
作者：刘云松；邓旭斌；苏磊
来源：中华急诊医学杂志 2014 年 6期
